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PCS-i220A/B柱后衍生儀在15藥典測定中應(yīng)用

 更新時間:2017-09-13 點擊量:2652

測量方法:

本法系用液相色譜法(通則0512)測定藥材、飲片及制劑中的毒素(以毒素B1、毒素B2、毒素G1,毒素G2總量計),除另有規(guī)定外,按下列方法測定。


液相色譜儀器構(gòu)成:
等度液相色譜儀(高壓輸液泵一臺、熒光檢測器一臺、柱溫箱一臺、進樣器1件、色譜柱一根等)
柱后衍生儀:PCS-i220A/B


色譜柱:PC C18 4.6×150mm,5μm
高速離心機:離心速度4000轉(zhuǎn)/分鐘以上
溶劑過濾器
超聲波清洗器
固相萃取儀
免疫親和柱
分析天平:萬分之一
均質(zhì)器(高速攪拌器):攪拌速度大于11000轉(zhuǎn)/分鐘

試劑
甲醇:色譜純
乙腈:色譜純
0.05%的碘溶液
超純水
毒素B1.毒素B2、毒素G1、毒素G2對照品

色譜條件
檢測器:熒光檢測器
色譜柱:PC C18 4.6×150mm,5μm
流動相:甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)
流速:1.0ml/min
柱溫:40℃
衍生溶液:0.05%的碘溶液(取碘0.5g,加入甲醇100ml使溶解,用水稀釋至1000ml制成)
衍生化泵流速:0.2ml/min
衍生化溫度:70℃
激發(fā)波長λex=360nm(或365nm),發(fā)射波長λem=450nm

混合對照品溶液的制備
精密量取毒素混合標準品(毒素B1、毒素B2、毒素G1、毒素G2標示濃度分別為1.0μg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/m1)0.5ml,置10ml量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,作為儲備液。精密量取儲備液1ml,置25ml量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,即得。 

供試品溶液的制備
取供試品粉末約15g(過二號篩),精密稱定,加入氯化鈉3g,置于均質(zhì)瓶中,精密加入70%甲醇溶液75ml,高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000轉(zhuǎn)/分鐘),離心5分鐘(離心速度4000轉(zhuǎn)/分鐘),精密量取上清液15ml,置50ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,用微孔濾膜(0.45μm)濾過,量取續(xù)濾液20.0ml,通過免疫親合柱,流速每分鐘3ml,用水20ml洗脫,洗脫液棄去,使空氣進入柱子,將水擠出柱子,再用適量甲醇洗脫,收集洗脫液,置2ml量瓶中,并用甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。 

測定方法
精密吸取上述混合對照品溶液20μl,注入液相色譜儀,測定峰面積。另精密吸取上述供試品溶液20μl,注入液相色譜儀,測定峰面積,計算出zui終結(jié)果。
毒素B1、B2、G1、G2對照品色譜圖:

 

 

以上是使用PCS-i220A/B柱后衍生儀 結(jié)果基線平穩(wěn) 峰型窄 檢出限低 檢測準確 *方法要求。

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